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Um zu messen, wie weit eine Verbindung gereist ist, wird die Entfernung von der ursprünglichen Position der Verbindung (die mit Bleistift markierte Basislinie) zum Ort der Verbindung nach der Elution gemessen (die ungefähre Mitte der Stelle, Abbildung 2.14 a). Aufgrund der ungefähren Natur dieser Messung sollten Linealwerte nur bis zum nächsten Millimeter aufgezeichnet werden. Um zu messen, wie weit das Lösungsmittel gereist ist, wird der Abstand von der Grundlinie zur Lösungsmittelfront gemessen.,
Die Lösungsmittelfront (Abbildung 2.14 b) ist für diese \(R_f\) Berechnung unerlässlich. Beim Entfernen einer TLC-Platte aus ihrer Kammer muss die Lösungsmittelfront sofort mit einem Bleistift markiert werden, da das Lösungsmittel häufig schnell verdunstet.
Da ein \(R_f\) im Wesentlichen ein Prozentsatz ist, ist es nicht besonders wichtig, einen TLC auf eine bestimmte Höhe auf der TLC-Platte laufen zu lassen. Abbildung 2).,15 wurde eine Probe Acetophenon in unterschiedliche Höhen eluiert, und das \(R_f\) wurde jeweils so berechnet, dass es ähnlich, wenn auch nicht identisch war. Geringfügige Schwankungen in \(R_f\) ergeben sich aus Fehlern im Zusammenhang mit Linealmessungen, aber auch aus unterschiedlichen Mengen adsorbierten Wassers auf den TLC-Platten, die die Eigenschaften des Adsorptionsmittels verändern. \(R_f\) Werte sollten immer als ungefähr betrachtet werden.
Obwohl theoretisch ein TLC in beliebiger Höhe ausgeführt werden kann, ist es üblich, das Lösungsmittel ungefähr \(0.5 \: \text{cm}\) von der Oberseite der Platte laufen zu lassen, um Fehler bei den \(R_f\) Berechnungen zu minimieren und die beste Trennung von Gemischen zu erreichen. Eine TLC-Platte darf nicht vollständig bis zur Oberseite der Platte laufen, da dies die Ergebnisse beeinträchtigen kann., Bei Verwendung einer gesättigten, versiegelten TLC-Kammer kann jedoch weiterhin das \(R_f\) berechnet werden.
Mitwirkende
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Lisa Nichols (Butte Community College). Bio-Chemie-Labor-Techniken ist lizenziert unter einer Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License. Vollständige text ist online verfügbar.