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Diagnostic rapide de la tuberculose pulmonaire par dosage IMMUNOSPOT lié à L’enzyme BAL chez un hôte immunodéprimé

rapport de cas

en janvier 2007, une femme de 38 ans non fumeuse s’est présentée à un hôpital extérieur, avec des antécédents de malaise sévère, de dyspnée progressive, de fièvres récurrentes et de toux sèche. Il y a environ 15 ans, la patiente a fui son pays D’origine, Le Sri Lanka, et, après une odyssée, elle a ensuite obtenu l’asile en Allemagne. Le patient a nié des antécédents de tuberculose ou des contacts connus avec la tuberculose.,

cependant, 18 mois avant l’admission, elle a progressivement développé des myalgies du haut des bras rayonnant dans les deux mains, accompagnées d’un gonflement récurrent des doigts, d’une douleur dans la colonne vertébrale supérieure, d’une raideur matinale et d’arthralgies symétriques des genoux. Le diagnostic de polyarthrite rhumatoïde séropositive a été réalisé après avoir trouvé le facteur rhumatismal dans son sérum, et un traitement par corticostéroïdes systémiques (20 mg d’équivalent prednisolone) a été initié avec une bonne réponse clinique., Malheureusement, 8 mois avant l’admission, après avoir réduit les corticostéroïdes à une dose de 5 mg·jour−1, les symptômes sont réapparus et un traitement hebdomadaire avec 15 mg de méthotrexate d’antimétabolite folate a été commencé afin d’épargner les corticostéroïdes.

L’examen physique à l’admission a révélé un œdème des mains, des pieds, des lèvres et des joues. Le patient a décrit l’apparition soudaine de doigts et d’orteils froids en association avec des changements de couleur de la peau fortement délimités, ce qui a été diagnostiqué comme le phénomène de Raynaud. Une hyposensibilité croissante des extrémités des doigts et des orteils a également été décrite., Lors d’un mouvement passif, le patient s’est plaint d’articulations douloureuses de la cheville, de la main et du genou. Il y avait des nodules violets douloureux sur les tibias et les veaux.

la numération globulaire périphérique a montré un taux d’hémoglobine de 11,5 g·dL−1, un nombre de globules blancs de 6,8×109 cellules·L−1 et un nombre de plaquettes de 275×109 cellules·L−1. Les taux de créatinine kinase (632 U·L−1), de γ-glutamyl transférase (96 U·L−1), de phosphatase alcaline (119 U·L−1), de lactate déshydrogénase (619 U·L−1) et de protéine C-réactive (89 mg·L−1) ont été élevés. Le taux de sédiments érythrocytaires était de 80 mm dans la première heure.,

Le dépistage du VIH, des hépatites B et C, du virus D’Epstein–Barr et de Borrelia burgdorferi s’est révélé négatif. Un anticorps antinucléaire avec un titre de 1: 20,480 (type moucheté) a été trouvé. Des anticorps dirigés contre la ribonucléoprotéine recombinante A, C et 68 KD ont été détectés. Le diagnostic de maladie mixte du tissu conjonctif (MCTD) a été réalisé et le traitement par prednisolone à une dose de 20 mg a été relancé sans poursuivre le méthotrexate.

malgré ces interventions, le patient souffrait d’une fièvre continue jusqu’à 39°C., Plusieurs hémocultures sont restées stériles et, malgré une imagerie radiologique étendue, aucun foyer pour sa maladie fébrile n’a pu être trouvé. Un test de libération d’interféron lymphocytaire T (IFN)-γ (Tigra; QuantiFERON-TB Gold in-tube testTM; Cellestis Ltd, Carnegie, Australie) sur le sang périphérique a été fortement positif avec 3,12 UI·mL−1 (valeur de coupure <0,35 UI·mL-1), suggérant une infection latente par la MTB, une tuberculose passée ou une tuberculose active., Comme les antigènes utilisés pour le TIGRA, la cible antigénique précoce (ESAT)-6 et la protéine filtrante de culture (CFP) -10 peuvent réagir de manière croisée avec les antigènes de Mycobacterium leprae 8, 9, une biopsie cutanée des lésions de la jambe inférieure a été réalisée, ce qui a révélé un diagnostic d’érythème nodeux. La PCR pour Mycobacterium leprae des lésions était négative.

Après 4 semaines d’hospitalisation, le patient a été transféré à la clinique des auteurs actuels (clinique médicale, Centre de recherche Borstel, Borstel, Allemagne) pour un diagnostic plus approfondi., Après l’admission, une tomodensitométrie à haute résolution du thorax n’a montré aucun épanchement pleural, adénopathie, cavitations, consolidations ou phénomènes d’arbre en bourgeon. L’opacité symétrique du verre broyé principalement dans les segments pulmonaires inférieurs, comme dans la pneumonie interstitielle non spécifique, compatible avec le diagnostic de MCTD, a été démontrée (fig. 1⇓) 10, 11.

iv xmlns:xhtml= »http://www.w3.org/1999/xhtml »> Fig., 1-

une tomodensitométrie représentative à haute résolution du thorax démontrant une opacité symétrique du verre broyé principalement dans les segments pulmonaires inférieurs, comme dans la pneumonite interstitielle non spécifique, compatible avec le diagnostic de maladie du tissu conjonctif mixte. Ni épanchements pleuraux, adénopathie, cavitations, consolidations ni phénomènes d’arbre en bourgeon n’ont pu être trouvés.

la tuberculine PPD RT 23 SSI (2 TU / 0,1 mL solution injectable; Statens Serum Institute, Copenhague, Danemark) a révélé 0 mm d’induration après 48 et 72 h., Cependant, avec un autre TIGRA spécifique au VTT, le T-SPOT.TB assay (Oxford Immunotec, Abingdon, Royaume-Uni), 59 et 31 cellules mononucléées (SFC) pour 250 000 cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) ont été dénombrées en réponse à L’ESAT-6 et à la CFP-10 dans des échantillons de sang (valeur de coupure >5 SFC/250 000 PBMC; fig. 2⇓ et tableau 1⇓). Un traitement par isoniazide 5 mg·kg−1 de poids corporel a été initié pour le diagnostic d’ITL.

Fig. 2—

Mycobacterium tuberculosis spécifiques enzyme-linked immunospot pour le diagnostic de la tuberculose pulmonaire., Les puits de microtitres sont montrés après incubation avec 250 000 cellules mononucléaires du sang périphérique (a, c, e et g) ou 250 000 cellules mononucléaires broncho-alvéolaires chacune (b, d, f et h) et non stimulées (témoins négatifs; A et b) ou stimulées avec de la phytohémaglutinine (témoins positifs; c et d), cible antigénique sécrétoire précoce-6 (e et f) ou protéine filtrat de culture-10 (g et h).,

voir ce tableau:

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Tableau 1—

nombre Net de cellules formant des taches (SFCs) et interprétation de la réactivité du dosage immunospot enzymatique spécifique de Mycobacterium tuberculosis

Les AFB n’ont pas été observées sur trois sputa matinaux distincts. L’ADN MTB n’a pas pu être détecté dans les expectorations du patient par une technique D’amplification D’acide nucléique spécifique à MTB (BDProbeTecTM et assay; Becton Dickinson, Sparks, MD, USA)., Par la suite, une bronchoscopie avec biopsies BAL et transbronchiques a été réalisée. Le comptage différentiel BAL a révélé une alvéolite lymphocytaire avec 77% de macrophages alvéolaires, 18% de lymphocytes, 4% de neutrophiles et 0,6% d’éosinophiles. Ni L’AFBs ni L’ADN MTB n’ont pu être détectés sur le BAL. L’examen histopathologique des biopsies a montré des infiltrats de lymphocytes et de cellules neutrophiles sans démonstration de granulomes.

ELISPOT spécifique au MTB (Oxford Immunotec) a été réalisé sur des cellules mononucléées BAL (BALMCs) comme décrit précédemment 7, pour distinguer la tuberculose active de L’ITL., Dans les témoins non stimulés, 117 SFCs/250 000 BALMCs ont été trouvés. Cependant, les nombres de SFCs ESAT-6 Et CFP-10 ont tous deux dépassé 400/250 000, démontrant des lymphocytes pré-stimulés et le recrutement de lymphocytes T spécifiques à l’antigène MTB dans le poumon, ce qui suggère fortement un pTB actif (fig. 2⇑ et tableau 1⇑).

à la réception de ces résultats, un traitement par la rifampine, l’éthambuthol et le pyrazinamide a été ajouté pour un traitement antituberculeux quadruple. Après 18 jours, le VTT a été découvert sur une culture d’expectoration du patient.

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