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22A:의 식별 황색포도상구 종

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목표

  • 익숙해 speciation 속의 황색포도상구.
  • 의 성장과정을 포함한 종를 사용하여 선택적 및 차 agar
  • 식별하는 용혈성 3 종류에 혈액 agar.,

황색포도상구균의 속 G+,nonspore-를 형성하는 구균 가족에 속하는 Micrococcaceae 는 종종 발견으로 정상적인 인간이 미생물의 피부과 비강. 다섯 가지가 있는 유기체를 고려해 잠재적인 인간의 병원체에서 이 속:S. 균,S.epidermidis,S.saprophiticus,S.haemolyticus,and S.hominis 하지만 처음 세 가장 일반적인 분리된다. S. 균은 종종 고려하여 가장 문제가 될 세 가지의 병원체와 구별된 다른 두는 하나만 할 수 있 응고 플라즈마입니다. 에스., aureusis 일으키는 원인이 될 수 있는 많은 표면 화농성(고름형성)감염의 진피 및 하부 조직을 뿐만 아니라 심각한 조직 감염. 장 독소(식중독),세포 독소(일반 전신 독소)및 독성 쇼크 초 항원을 포함한 다양한 독소를 생산할 수 있습니다. 기타 응고 부정적인을 포함한(S.epidermidis S.saprophiticus)훨씬 덜 자주 발견으로 병원체 그러나 때때로 관련된 심내막염,인공관절염,그리고 상처를 감염,그냥 몇 가지 이름이다.,

이 운동을 제공합을 사용 할 수있는 기회를 선택적인 미디어,이 경우 기반에 높은 나트륨 염화물(MSA 및 SM1 10 은 모두 선택적 미디어의 절연을 위한 포도상 구균-7.5%NaCl). 선택적인 매체에는 다른 사람을 금해서 특정 박테리아의 성장을 호의를 보이는 억제 대리인이 있습니다. MSA 에는 만니톨 발효를 모니터링하기위한 추가 표시기가 포함되어있어 차동 매체도 만듭니다., 박테리아의 성장할 수 있는 존재 하에서의 고 NaCl,일부는 고정(필요한 특정 농도의 소금물)동안 다른 haloduric(를 사용하지 않는 소금만을 허용할 수 있다). 포도상 구균은 높은 NaCl 농도에 살거나 견딜 수 있다는 점에서 halophilic 이 아니라 오히려 haloduric 입니다. SM1 10 및 MSA 의 높은 염 함량은 다른 일반적인 피부 미생물을 억제합니다. 이 운동에 사용되고있는 다른 매체는 병원성 포도상 구균을 비병원성과 차별화하기위한 것이고,종의 식별을위한 것이다.,

뿐만 아니라 염 저항성,포도상 구균은 항상 facultatively 혐기성입니다. 얼룩이지면 작은 클러스터(staphylo=cluster)에서 볼 수 있습니다. 포도상 구균은 일반적으로 베타 용혈성이거나 전혀 용혈되지 않습니다(감마 용혈이라고합니다). 병원성을 포함한 생산할 수 있는 다양한 독성 요소를 포함하여,독소,응고,leucocidins,그리고 가수분해 효소를 손상시킬 수 있는 호스트의 조직.

혈액 한천(BAP)은 5%양의 혈액으로 만들어집니다. 때문에 박테리아를 배양하는 데 사용되는 일반적인 매체입니다:

  1. 까다로운 박테리아를위한 훌륭한 농축 매체입니다.,
  2. 혈액 세포의 용혈은 식별 검사로서 매우 유용 할 수 있습니다.

CNA 한천은 혈액 한천의 한 유형입니다. 유일한 차이점은 CNA 에는 그람균을 억제하는 항생제 인 naladixic acid 가 있다는 것입니다.이것은 적혈구의 분해입니다. 헤 몰리 신은 일부 박테리아에 의해 생성되는 효소이며 박테리아 콜로니 주변의 배지로 방출됩니다. 그것은 헤모글로빈의 방출과 식민지 주변의 주변 매질에서 적색을 제거하는 세포의 완전한 고장 일 수 있습니다., 또는 용혈은 부분적으로 붕괴되어 식민지 주변에 녹색 또는 녹색-황색 영역이 생길 수 있습니다.,i>

  • VP 국
  • 질산 국
  • thioglycollate 국물(위한 혐기성장)

    • 개략도의 식별 절차

    제 1 회⇒2 세션⇒제 3 세션⇒4 세션

    CNA DNAse 응고 실행에 필요한 다른 테스트를 확인 종

    MSA SM110ONPG

    Catalase 산화

    그램 Phenol red 유

    얼룩 국

    절차

    참고.

    을 유지해야 목록에 대한 모든 테스트 결과 분리된다.,

    1st Session

    1. 각 표에는 aNA 또는 TSA 판에서 자라는 포도상 구균 종이 주어질 것입니다.
    2. 격리 행진 기술을 사용하여 컬럼비아 naladixic 산(CNA)을 접종하고 섹션 1 에 novobiocin 디스크를 놓습니다.
    3. Novobiocin 감도는 포도상 구균 종의 일부 중 주요 차별화 기능입니다. 포셉을 알코올에 넣은 다음 화염을 통해 빠르게 실행하여 포셉을 소독하십시오. 알코올은 불에 붙잡을 것이고 포셉에서 증발하면 멸균 될 것입니다., 할 수 있습을 선택 novobiocin 디스크에서 홀더에 배치 CNA 플레이트에서 첫 번째 연속 섹션(가있을 것입니다 confluent 성장의 박테리아).
    4. 에 대해 다른–agar plate SM110 플레이트,만니톨 소금 agar(MSA)접시,DNAse agar plate—접종 라인의 아래 중앙의 플레이트가 적절한 성장을 위한 결과입니다.
    5. 37℃에서 배양 배양
    6. 판 배양에서 산화 효소 및 카탈라아제 검사를 실행하십시오.
    7. 그램은 그람 반응뿐만 아니라 모양과 배열을 얻기 위해 분리 물을 얼룩지게합니다.
    8. 우리는 다음 세션에서 ONPG 테스트를 할 것입니다., 그 테스트는 유전자 세트 인 lac operon 의 전원을 켜야합니다. 이 활동을 유도하기 위해서는 박테리아가 유당에 노출되어야합니다. 이것은 또한 페놀 레드 유당 국물의 튜브를 접종하는 이유입니다.

    2 세션

    1. 가 개별적인 실험실이 운동을 해석하는 만니톨 소금과 DNAse 테스트(이 필요합 HCl).
    2. CNA 플레이트에서 2 가지 반응—novobiocin 항생제에 대한 민감성과 혈액 용혈을 확인하고 있습니다.,
      1. Novobiocin 감도-의 영역 17mm 음을 나타냅 감
      2. 용혈성 반응:
        • alpha(α)용혈 녹색 지역의 주위에 식민지에 의해 발생하는 누출 헤모글로빈로 변환하여 베르 딘,라고 부분적인 용혈
        • 베타(β) 용혈–완전한 청산의 주위에 식민지에 의해 발생한 고장의 적혈구에 의해 streptolysin 효소
        • gamma(γ)혈-아 hemolysins,아무 영역
          • 황색포도상구 종는 베타 용혈성 또는 감마(지 않은 용)., 포도상 구균은 일반적으로 베타(완전)용혈의 넓은 영역을 유발하는 알파 독소를 생성합니다.
    3. 체크인 SM110 를 위한 성장과 안료입니다. 이 배지의 영양소와 비타민은 병원성 포도상 구균의 색소 침착을 향상 시키며,그 식민지는 아옐로 오렌지 식민지가됩니다.
    4. coagulase 테스트를 실행하십시오.이 테스트를 위해 연결된 운동이 있습니다. 응고 효소 검사(아래 표 참조)에 양성인 포도상 구균 종은 몇 종 뿐이며 S.aureus 가 가장 흔합니다., 이 있기 때문에 있는 2 종류의 응고 효소 바인딩 및 무료—2 가지 다양한 테스트를 식별하는 데 사용할 수 있는 이러한 효소입니다. 튜브 방법은 가장 신뢰할 수있는 2 의 확실한 테스트입니다. 실험실 설명서의 응고 효소 시험 운동은이 2 가지 버전을 명확하게 설명합니다.
    5. ONPG 테스트가 실행됩니다. 테스트를 실행하는 방법에 대한 방향에 대해이 테스트에 대한 실험실 연습을보십시오. 튜브에 액체가 거의 없기 때문에 튜브의 상단을 파라 필름으로 덮고 그 위에 튜브 상단을 놓고 싶을 것입니다. 이것은 탈수를 감소시킵니다.,

    제 3 세션

    1. 주요 테스트 반응에 사용하는 황색포도상구 식별이 응고 시 반응을 나누는 황색포도상구균 속으로 2 단체—응고 부정적인 종이와 응고 긍정적인 종합니다. 식별을 위해 실행할 테스트 매체는 유기체가 어느 범주에 해당하는지에 따라 다릅니다. 다음 테스트 중 일부를 실행하고 싶을 수도 있습니다.,
    • Available media:
      • arginine and ornithine
      • decarboxylase broths
      • urea broth
      • ONPG
      • sucrose, trehalose, maltose sugars
      • VP broth
      • nitrate broth
    1. If you have a coagulase positive Staph, there are only a few species available as your choice: there is a table with those species below.,
    2. 경우 생물은 응고 부정적인 확인,아래 흐름뿐만 아니라,Bergey 의 수동 또는 기타 식별 책입니다.
    3. 식별을 위해 필요한 테스트를 실행합니다. 명확한 식별을 위해 실행할 추가 테스트를 결정하는 것은 귀하에게 달려 있습니다.

    4 세션

    1. 읽 모든 테스트에서 마지막 세션(참조하십시오 실험 연습 문제에 대한 정보에 테스트 해석입니다.
    2. 강사가 귀하에게 그렇게하도록 지시하는 경우 귀하의 포도상 구균 종 식별에 대한 보고서를 작성하십시오.,
    Table 1: Differentiation among Coagulase Positive Staphylococci
    Tube coagulase Acid from trehalose VP test ONPG test
    S. aureus + + + –
    S. intermedius + + – +
    S., hyicus variable + – –
    S. schleiferi + – + ?

    Common coagulase negative Staphylococcal species

    Table 2: Differentiation of S., aureus from other common human staphylococci normal flora
    S. aureus S. epidermidis S. saprophiticus
    Alpha toxin (ß-hemolysis) + (most strains) – –
    Growth on 7.,acace93570″>

    DNase production

    		+ (usually) – –
    Sensitivity to novobiocin sensitive sensitive resistant

    * Novobiocin sensitivity = >17mm zone size

    QUESTIONS

    1. Which type of hemolysis is often associated with pathogenicity?,
    2. 속 포도상 구균의 구별되는 특징은 무엇입니까?
    3. MSA,SM110,coagulase,catalase,oxidase 및 DNAse 의 각 주요 테스트에 대해 S.aureus 의 테스트 반응을 줄 수 있습니까?
    4. 베타 및 알파 용혈에서 RBCs 는 어떻게됩니까?

    참가자와 속성

    • Jackie 레이놀즈,교수의 생물학(리치랜드에 위치한 대학)

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