espectrometria de massa, Também referida como espectrometria de massa, é uma técnica analítica que se torna cada vez mais importante na investigação da biociência. Este artigo irá apresentá-lo a esta técnica, como ela funciona, e como ela pode ser útil para você em sua pesquisa. Então vamos começar com a sua introdução à espectroscopia de massa…
o que é espectrometria de massa?
em poucas palavras, a espectrometria de massa mede com precisão a massa de diferentes moléculas dentro de uma amostra., Mesmo grandes biomoléculas como proteínas são identificáveis pela massa, o que significa que os biólogos podem realizar alguns experimentos muito interessantes usando espectroscopia de massa, potencialmente adicionando uma nova dimensão à sua pesquisa.pode a espectroscopia de Massa ser útil para mim?
Sim, se você deseja:
- Identificar moléculas em uma mistura
- detecção de impurezas na amostra
- Analisar uma proteína purificada
- Estudo o teor de proteína de uma amostra de células
Como Massa de Especificações de Trabalho?
Existem três fases chave para o espectrómetro:
1. Ionizacao.,
As moléculas de uma amostra são vaporizadas (convertidas para a fase gasosa por aquecimento). Então, um feixe de elétrons bombardeia os vapores, que converte os vapores em íons. Como a espectroscopia de massa mede a massa das partículas carregadas, apenas íons serão detectados, e moléculas neutras não serão vistas.iões
são criados dando elétrons a uma molécula (produzindo um íon carregado negativamente) ou retirando elétrons de uma molécula (produzindo um íon carregado positivamente).nota: uma amostra só pode ser analisada por espectroscopia de massa se puder ser vaporizada sem decomposição.
2., Aceleração e deflexão.em seguida, os íons são ordenados de acordo com a massa em dois estágios – aceleração e deflexão.
aceleração é uma atração simples. Os íons positivos criados no estágio de ionização aceleram para placas negativas a uma velocidade dependente de sua massa. Por outras palavras, as moléculas mais leves movem-se mais depressa do que as mais pesadas.a deflexão é o bit magnético … os íons são então deflectidos por um campo magnético, e a extensão da deflexão é novamente dependente da massa. Então, íons de diferentes massas viajam através do espectrômetro em diferentes velocidades.
3. Deteccao.,
Ions de aumento de massa eventualmente chegar ao detector um após o outro, e então é sobre o computador para fornecer um espectro. A saída se parecerá com a Figura 1.
Figura 1. Espectro de amostras produzido por espectrómetro de massa. Espectro de massa simplificado de pentano (CH3CH2CH2CH2CH3).Nota: Este espectro de massa simplificado foi desenhado usando dados do sistema de Base de dados espectral para compostos orgânicos (SDBS) no Instituto Nacional de materiais e Pesquisa Química no Japão.,a omissão de linhas menores com alturas de pico iguais ou inferiores a 2% do Pico de base (o pico mais alto) proporciona clareza.
lendo o espectro
Em primeiro lugar, você deve notar que simplesmente ‘massa’ no eixo x, Mas ‘m/z’, onde m é a massa e z é a carga. O que o espectrómetro realmente mede é a relação massa/carga (m/z). Parece complicado, mas não é—porque a maioria dos íons produzidos durante a MS tem uma carga de 1, m/z é normalmente igual à massa da molécula. Simples.a espectroscopia de massa vale a pena?
numa palavra: sim., Espectroscopia de massa fornece o peso exato medidas para a sua bio- (ou outros) de moléculas, que pode ser usado para:
- Dê uma boa estimativa sobre o grau de pureza da amostra (por exemplo, se existe um ou mais molecular de espécies na amostra e que relação essas espécies encontram-se em)
- Monitor de reações, seqüência de aminoácidos, e oligonucleotídeos, bem como dar informações sobre a estrutura de proteínas
- Identificar e quantificar amostras
a espectrometria de Massa permitiu a biologia para se deslocar de identificação única de proteínas para proteoma-ampla caracterização e quantificação., Com o desenvolvimento desta ferramenta, os pesquisadores podem agora começar a definir caminhos bioquímicos em uma base cinética, o que nos ajudará a entender a resposta mecanicista das células a ambientes em mudança.peptídeos, hospitais, drogas e cenas de Crime: usos práticos da espectroscopia de massa
empresas e pesquisadores de drogas estão usando a técnica para a descoberta de drogas, para obter informações sobre metabolismo de drogas e para estudos farmacocinéticos.2 o estudo das proteínas através da espectrometria de massa é agora auxiliado por informações obtidas a partir dos projectos de sequenciação do genoma.,3 a técnica também encontrou usos médicos, tais como rastreamento neonatal, análise de sangue, e testes de drogas. Estes usos também fazem da espectroscopia de massa (quando associada a outras técnicas analíticas) uma ferramenta poderosa na análise forense.como faço para usar espectroscopia de massa?se achar que a espectroscopia de massa pode ser útil na sua pesquisa, Verifique se o seu departamento ou faculdade tem espectrómetros de massa disponíveis para utilização. Isto pode ser tanto como um serviço ‘walk up’ onde você reservar uma fenda e executar suas próprias amostras ou como um serviço técnico-executado., A formação será sempre fornecida para estes serviços, por isso pergunte ao redor. Enquanto o número de usos é grande, o instrumento em si não é —normalmente a máquina pode caber em um banco superior.
mas lembre-se disto antes de usar um espectrómetro de massa comunitário…
o factor mais importante para obter resultados precisos é mantê-lo limpo e livre de contaminantes. Como muitos químicos vão testemunhar, este é muitas vezes um problema com espectrômetros de massa comunais—especialmente se o Usuário antes de você não fez a coluna corretamente. É sensato trazer o seu próprio solvente para limpar a coluna antes (e depois!) usar.,queres saber mais?
este artigo foi uma breve introdução aos conceitos básicos da espectrometria de massa, mas não termina aqui! Existem várias formas de produzir o íon necessário, e o método escolhido depende da natureza da molécula de amostra. Você pode encontrar mais informações nas referências abaixo.Baker M. (2010) Mass spectrometry for biologists. Métodos Da Natureza. 7:157.Ashcroft AE. Uma introdução à espectrometria de massa.Yates JR.espectrometria de massa em biologia. In: Encyclopedia of Life Sciences. p. London: Nature Publishing Co.; 2001. 1–5.,
originalmente publicado em 2011, republicado em 2016.
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