termi mikrobien kasvu tarkoittaa kasvua apopulation (tai lisätä solujen määrä), ei kasvua koko puolustamista solu. Solunjakautuminen johtaa solujen kasvuun populaatiossa.
kahdenlaisia AsexualReproduction Mikrobien:
1.) Binäärinen fissio-bakteerien lisääntyminen tapahtuu fission kautta, joka on alkeellinen sellidivisioinnin muoto, joka ei käytä Kara fiberapparatus., Bakteerisolu kaksinkertaistuu ja replikoi kromosominsa. FollowingDNA replikointi, kaksi kromosomia liittää erillisiä sivustoja solukalvon ja solun seinä on vahvistettu niiden välillä, jotka tuottavat kahdeksi tytärsoluksi.
2.) Orastava – muutama bakteerit ja jotkut eukaryooteissa(mukaan lukien hiivat) voi myös jäljitellä orastava,muodostaen kupla-kuten kasvu, joka laajenee ja irtoaa vanhempi solu.
I. Mikrobien Kasvua
A., Phasesof Growth-Amicrobial lab kulttuuri tyypillisesti kulkee läpi 4 erillistä, peräkkäiset vaiheet growthat muodostavat standardin bakteerien kasvukäyrä: (ei allgrowth vaiheet esiintyvät kaikissa kulttuureissa). Katso kaavio ;piirtokelpoinen & etiketti.
1. Lagfaasi-lag-vaiheessa solujen määrä ei kasva. Huomattavaa metabolista aktiivisuutta esiintyy kuitenkin solujen valmistautuessa kasvamaan., (Tämä vaihe ei voi esiintyä, jos thecells tapana rokottaa uusi kulttuuri ovat log-vaihe & edellyttäen, että ehdot ovat samat).
2. Logfaasi (logaritminen tai eksponentiaalinen faasi) – soluluvut kasvavat eksponentiaalisesti; syntyvyyden aikana solujen määrä populaatiossa kasvaa kertoimella Kaksi). Mikrobien määrä eksponentiaalisesti lisääntyvässä populaatiossa kasvaa aluksi hitaasti, sitten erittäin nopeasti., Organismien putki elatusaine voi maintainlog kasvua vain rajoitetun ajan, koska ravinteet ovat käytetty, aineenvaihdunnan jätteet kertyvät,microobes kärsivät hapen puutteesta.
3. StationaryPhase – solujen määrä ei kasva, mutta muutoksia soluissa tapahtuu: solu tullut smallerand koota osat auttaa heitä selviytymään pidempään ilman kasvava (jotkut mayeven tuottaa endospores); signaali syöttää tämä vaihe voi olla tekemistä ahtaudesta(kertyminen aineenvaihdunnan sivutuotteita, ehtyminen ravinteiden, jne.).
4., DeathPhase-tässä vaiheessa solut alkavat kuolla. Kuolema tapahtuu eksponentiaalisesti, mutta alhaisella nopeudella. Kuolema johtuu siitä, että soluilla on loppunut solunsisäiset ATP-varannot. Kaikki solut eivät välttämättä kuole tässä vaiheessa!
B. ContinuousCulture Mikrobeja
laboratoriossa kulttuureissa yleensä kulkea throughall kasvun vaiheet – ei luonnossa. Luonnossa ravinteita jatkuvasti syöttää solun ympäristössä pieninä pitoisuuksina, ja populationsgrow jatkuvasti alhaisella mutta tasaisesti., Thegrowth korko on asetettu pitoisuus scarcest tai rajoittamalla ravinteiden, ei theaccumulation aineenvaihdunnan sivutuotteita – luonnossa on aina jonkin verran muita mikrobi mahdollista käyttää näitä aineenvaihdunnan sivutuotteita oman aineenvaihduntaa. Labrassa meidän on jatkuvasti korvattava themedia.
II. Mittaus määrä Mikrobeja
A., Epäsuorat Mittaukset(toimenpide omaisuutta massa soluja, ja sitten ARVIOIDA määrä mikrobeja)
1. Sameus-voi pitää putki jopa valoa ja etsiä pilvisyyttä osoituksena kasvusta (vaikea havaita vähäistä kasvua). Aspectrophotometer voi mitata, kuinka paljon valoa ratkaisu mikrobien solun lähettää; thegreater massa solujen kulttuuri, sitä suurempi sen sameus (pilvisyys) ja silti valo, joka toimitetaan., Haitat: Ole herkkä mitattuna määrä bacterialcells & ole hyödyllistä havaita pienimmätkin epäpuhtaudet.
2. MetabolicActivity – 3ways:
a. Therate muodostumista aineenvaihduntatuotteiden, kuten kaasut tai hapot, että kulttuuri tuottaa.
b. Therate hyödyntäminen alustaan, kuten hapen tai glukoosin.
c. tiettyjen väriaineiden pelkistyminen. Ex.metyleenisininen muuttuu pelkistettynä värittömäksi.,
B. Suorat Mittaukset – Antaaenemmän tarkkoja mittauksia määrä mikrobeja.
1. DirectCounts – Coulter Counter – elektroninen laskuri; nopea & tarkka vain, jos bakteeri-solut ovat vain hiukkasia liuoksessa. .
3. PlateCount-bakteeripesäkkeitä tarkastellaan suurennuslasin läpi akoloni-laskuruudukkoa vastaan; kutsutaan Quebecin siirtokunnan laskuriksi (meillä on tämä laboratoriossa).
4., Suodatus-tunnettu tilavuus nestettä tai ilmaa vedetään kalvosuodattimen läpi tyhjiössä. Suodattimen ihohuokoset ovat liian pieniä formikrobisoluja läpäistäväksi. Sitten suodatin asetetaan asianmukaiselle kiinteälle väliaineelle ja haudotaan. Kehittyvien pesäkkeiden määrä on suodatetun nesteen tilavuudessa oleva elinkykyisen mikrobisolun määrä. Tämä tekniikka onhyvä näytteen keskittämiseen, ex. Uima-allas, jossa pienet populaatiot voivat löytyä joitakin muita menetelmiä käyttäen.
III., Kasvun Tekijät – Microbescan olemassa hyvin monissa ympäristöissä, koska ne ovat pieniä, helposti hajallaan, on onlysmall määriä ravinteita, ovat erilaisia niiden ravitsemukselliset vaatimukset.
A. PhysicalFactors
1. pH bacteriacan luokiteltu:
a. acidophiles(happo-rakastava) kasvavat parhaiten pH 1 5.4; Ex. Lactobacilllus (fermentoi maito)
b. neutrophilesolemassa vuodesta pH 5,4 8.,5; useimmat ihmisen tautia aiheuttavat bakteerit kuuluvat tähän luokkaan.
c. alkaliphiles(base rakastava) olemassa vuodesta pH 7,0 11,5; ex. Vibrio cholerae (aiheuttaa kolera)
2. Lämpötila bakteerit voidaan luokitella seuraavasti:
a. psychrophiles(kylmä-rakastava)15oC pitää 20 ° c: ssa; jotkut voivat kasvaa 0oC.
b. mesofiilit – kasvavat parhaiten välillä 25oC-40 C; humanbody temp on 37oc.
c., thermophiles(lämpöä rakastava) 50oC 60oC; löytyy komposti kasoihin ja kiehuvaan hotsprings.
3. Kosteus-vain urheilua muodostavien bakteerien itiöt voivat olla lepotilassa kuivassa ympäristössä.
4. Hydrostaticpressure – paineistettu seisova vesi (ENT. järvet, valtameret jne.); jotkut bakteerit voivat selviytyä vain hydrostaattisissa paineympäristöissä (esim., valtameren laaksot yli 7000 metriä); korkealaatuisessa paine on tarpeen pitää niiden entsyymien oikea 3-D muoto; ilman sitä, theenzymes menettävät muotonsa ja laimentavat ja solu kuolee.
5. Tonicity(hypotoninen,hypertoninen, isotoninen) suolan käyttöä säilöntäaineena kuivatuksen lihaa ja käyttöön sokeria tehdä hyytelöitä perustuu siihen, että hypertoninen ympäristö tappaa orinhibits mikrobien kasvua. Halofiilit (suolan ystävät) asuvat valtamerissä.
6., Radiation UV rays and gamma rays can causemutations in DNA and even kill microorganisms. Somebacteria have enzyme systems that can repair some mutations.
B. OxygenRequirements
1. strictor obligate anaerobes oxygenkills the bacteria; ex. Clostridium tetani
2. strict or obligate aerobes lackof oxygen kills the bacteria; ex. Pserdomonas
3., facultative anaerobes canshift their metabolism (anaerobic if oxygen is absent or aerobic if oxygen is present); ex. E. coli,Staphylococcus
4. aerotolerant thebacteria dont use oxygen, but oxygendoesnt harm them; ex. Lactobacillus
5. microaerophiles likelow oxygen concentrations and higher carbon dioxide concentrations; ex. Campylobacter
C., Ravintoarvo(Biokemiallisia) Tekijät Nutrientsneeded, jonka mikro-organismit ovat:
hiili Hiili sisältää yhdisteitä tarvitaan energianlähteenä (ex. glukoosi) ja kieltävät lohkot.
Typpeä tarvitaan aminohappojen ja nukleotidien; jotkut voivat koota kaikki 20 aminohappoa; othershave on joitakin edellyttäen, että niiden keskipitkän.,
Rikkiä tarvitaan aminohappoja, koentsyymejä,
Fosforitarvitaan ATP, fosfolipidit, ja nukleotidit
Vitamiinit a-vitamiini on orgaaninen aine, joka organismi vaatii pieniä määriä ja on tyypillisesti käytetään koentsyymi; monet bakteerit tehdä omia, mutta jotkut ovat requiredin keskipitkän; mikrobit elävät ihmisen suolistossa valmistaa K-vitamiinia, tarvitaan forblood hyytymistä, ja jotkut B-vitamiineja, mikä hyödyttää niiden isäntä.
Certrace elements-ex., kupari, rauta, sinkki, natrium, kloridi, kalium, kalsium, jne.; toimivat usein entsymaattisissa reaktioissa askofaktoreina.
A. Methodsof Saada Puhtaat Viljelmät (aculture, joka sisältää vain 1 laji organismi)
1. TheStreak Levy Menetelmä Bacteriaare kyytiin steriilillä silmukalla, ja johto on siirretty kevyesti pitkin agarsurface, tallettamalla raitoja bakteerit pinnalla., Silmukka leimahtaa ja muutama bakteeri poimitaan jo alueelta ja striimataan uudelle alueelle. Fewerand vähemmän bakteereja talletetaan, kun streaking jatkuu, ja silmukka liehuu aftereach streaking. Yksittäiset eliöt (yksittäiset solut) kerääntyvät alueelle, joka on viimeisenä. Kun levy inkuboidaan sopivassa growthtemperature organismin, pieniä pesäkkeitä (kukin peräisin yksittäisen bakteerisolun)näkyvät. Silmukan avulla poimitaan eristetyn yhdyskunnan portion ja siirretään se toiseen tutkimusaineeseen., Aseptisen tekniikan avulla varmistetaan, että newmedium sisältää yhden lajin eliöitä. Teemme tämän laboratoriossa.
IV. CULTUREMEDIA
A. medioita
1. Synteticmedium-valmistaa laboratorion materiaaleista, joilla on tarkka tai kohtuullisen hyvin määritelty koostumus.
2. Complexmedium sisältää tiettyjä kohtuullisen tuttuja materiaaleja, mutta vaihtelee hieman kemian compositionfrom erien (sisältää otteita naudan -, hiiva -, veri); ex., nutrient agar,ravinteiden liemi
B. Valikoiva & DifferentialMedia (me oppia näistä yksityiskohtaisesti lab!)
1. Selektiivinen-onethat kannustaa joidenkin bakteerien kasvua, mutta tukahduttaa toisten kasvua.
2. Differentiaali-on ainesosa, joka aiheuttaa havaittavan muutoksen väliaineessa, kun hiukkaskemiallinen reaktio tapahtuu (esim. väri tai pH: n muutos).
C., Valvoa Happipitoisuus ofMedia
1. Candlejars theinoculated putki tai levy on sijoitettu purkki; kynttilä palaa ennen kuin purkki on suljettu; theburning kynttilä käyttää happea purkkiin ja lisää hiilidioksidia se, kun carbondioxide sammuttaa liekin, kunto on optimaalinen kasvulle microorganismsthat vaativat pieniä määriä hiilidioksidia (ex. Neisseriagonorrhoeae)
2., Thioglycollatemedium happea sitova aine lisätään keskipitkän estää hapen kohdistamaan toxiceffects on anaerobeja; media on yleensä annostellaan sinetöity ruuvi-cap putket.
3. Anaerobischamber (Olutpurkki) Acatalyst lisätään säiliön kannessa olevaan säiliöön. Kaasu-pakiin lisätään vettä. Vesi muuttuu vetykaasuksi ja hiilidioksidiksi. Tämän jälkeen vetykaasu voi sitoutua mihin tahansa purkissa olevaan Happeen muodostaen vettä. Metyleenisininen testiliuska sisältyy testijaariin sen varmistamiseksi, että anaerobiset olosuhteet saavutetaan., Hapetettuna (happea on) liuska on sininen; pelkistettynä (ei happea), thestrip on kirkas.