Good Mood

notera

var noga med att hålla en lista över alla testresultat för dina isolat.,

första sessionen

1. varje tabell kommer att ges en stafylokockart som växer på aNA-eller tsa-platta.
2. med hjälp av en isolationsspårsteknik, inokulera Columbia naladixinsyra (CNA) och placera novobiocinskivan i avsnitt 1.
3. Novobiocin känslighet är en viktig differentiering funktioner bland några av Staphylococcus arter. Placera pincett i alkoholen och sterilisera sedan tången genom att köra dem snabbt genom flammen. Alkoholen kommer att brinna och när de förångas från tången kommer de då att vara sterila., Du kan nu välja en novobiocinskiva från hållaren för att placera på CNA-plattan—i den första streak-sektionen (där bakteriens sammanflöde kommer att växa).
4. för de andra agarplattorna — SM 110 plate, mannitol salt agar (MSA) plate, DNase agar plate—en ympningslinje ner i mitten av plattan är tillräcklig för tillväxtresultat.
5. inkubera media vid 37°C.
6. kör oxidas-och katalastest på plattkultur.
7. Gram fläckar isolatet för att få form och arrangemang samt gram-reaktion.
8. Vi kommer att göra ONPG-testet nästa session., Det testet kräver att en uppsättning gener, lac-operonen slås på. För att inducera denna aktivitet måste bakterien utsättas för laktos. Det är därför du också kommer att ympa ett rör av fenolrött laktosbuljong.

2: A sessionen

1. gå till individuella laboratorieövningar för att tolka mannitolsalt och dnastest (kräver HCl).
2. på CNA-plattan kontrollerar du 2 reaktioner– – känslighet för novobiocin antibiotikum och hemolys av blod.,
   1. Novobiocin känslighet – En zon av 17 mm anger känsligheten
   2. Hemolytiska reaktioner :
      • alpha (α) hemolys–gröna zonen runt kolonin, orsakade av läckande hemoglobin omvandlas till biliverdin, som kallas en partiell hemolys
      • beta (β) hemolys–komplett rensa runt kolonin som orsakas av nedbrytning av röda blodkroppar genom att streptolysin enzymer
      • gamma (γ) hemolys – nr hemolysins, ingen zon
        • Staphylococcus arter är antingen beta-hemolytiska eller gamma (inte hemolytisk)., Staph aureus producerar alfa-toxin som vanligtvis orsakar breda zoner av beta (komplett) hemolys.
3. kontrollera SM 110 för tillväxt och för pigment. Näringsämnen och vitaminer i detta medium förbättrar pigmenteringen av den patogena stafylokocken, de kolonierna blir ayellorange koloni.
4. kör koagulastestet: det finns en länkad övning för detta test. Det finns bara några arter av stafylokocker som är positiva för koagulastestet (se tabellen nedan), och S. aureus är den vanligaste., Eftersom det finns 2 typer av koagulasenzymbunden och fri – – – finns det 2 olika test som kan användas för att identifiera dessa enzymer. Rörmetoden är det definitiva testet av 2, den mest tillförlitliga. Koagulastestövningen i labbhandboken beskriver tydligt dessa 2 versioner.
5. ONPG-testet körs. Titta i dina labbövningar för detta test för anvisningarna om hur du kör testet. Eftersom det finns mycket lite vätska i röret, du kommer att vilja täcka toppen av röret kommer parafilm och sedan placera röret toppen över det. Detta minskar uttorkning.,

3: e sessionen

1. den huvudsakliga testreaktionen att använda vid Stafylokockidentifiering är koagulastestreaktionen, som delar släktet Staphylococcus i 2 grupper—koagulasnegativa arter och koagulaspositiva arter. Testmediet som du kommer att köra för identifiering beror på vilken kategori din organism faller i. Du kanske vill köra några av följande tester.,

• Available media:
  • arginine and ornithine
  • decarboxylase broths
  • urea broth
  • ONPG
  • sucrose, trehalose, maltose sugars
  • VP broth
  • nitrate broth

1. If you have a coagulase positive Staph, there are only a few species available as your choice: there is a table with those species below.,
2. om dina organismer är koagulasnegativa, kontrollera flödesschemat nedan, samt Bergeys Manual eller andra identifieringsböcker.
3. kör nödvändiga tester för identifiering. DET ÄR UPP TILL DIG ATT AVGÖRA VAD SOM EXTRA TESTER FÖR ATT KÖRA EN TYDLIG IDENTIFIERING.

4: e sessionen

1. Läs eventuella tester från förra sessionen (se lab övningar för information om test tolkningar.
2. Skriv upp en rapport för din Staphylococcus-artidentifiering, om din instruktör leder dig att göra det.,

Common coagulase negative Staphylococcal species

* Novobiocin sensitivity = >17mm zone size