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免疫不全宿主におけるBAL酵素リンク免疫スポットアッセイによる肺結核の迅速な診断

症例報告

2007年には、38歳の禁煙女性が外の病院に提示され、重度の倦怠感、進行性呼吸困難、再発発熱および乾いた咳の3週間の病歴を有する。 約15歳前、患者は母国のスリランカを逃れ、オデッセイに続いて、彼女はドイツで亡命を許可されました。 患者は結核または既知の結核の接触の病歴を否定した。,

しかし、入院の18ヶ月前に、彼女は徐々に両手に放射上腕の筋痛を発症し、指の再発腫れ、上脊椎の痛み、朝のこわばりおよび膝の対称関節痛を伴った。 血清中にリウマチ因子を見出した後に血清陽性関節リウマチの診断を行い、全身性コルチコステロイド(プレドニゾロン当量の20mg)による治療を良好な臨床反応で開始した。, 残念なことに、入院の8ヶ月前に、コルチコステロイドを5mg·day−1の用量に先細りした後、症状が再び現れ、コルチコステロイドを惜しまないために、葉酸代謝antim抗薬メトトレキサート15mgによる毎週の治療が開始された。

入院時の身体検査では、手、足、唇および頬の浮腫が明らかになった。 患者は皮膚の急激な色の変化に関連して冷たい指とつま先の突然の発症を記述し、これはレイノー現象と診断された。 また,指および足指先端の低感受性の増加についても述べた。, 受動運動により,患者は痛みを伴う足首,手および膝関節を訴えた。 けい骨と子牛の両方に痛みを伴う紫色の結節があった。

末梢血数は11.5g·dL−1のヘモグロビンレベル、6.8×109細胞·L−1の白血球数および275×109細胞·L−1の血小板数を示した。 クレアチニンキナーゼ(632U·L−1)、γ-グルタミルトランスフェラーゼ(96U·L−1)、アルカリホスファターゼ(119U·L−1)、乳酸脱水素酵素(619U·L−1)とC反応性タンパク質(89mg·L-1)のレベル 赤血球沈降物速度は、最初の時間以内に80ミリメートルであった。,

HIV、b型肝炎およびC型肝炎、Epstein–Barrウイルス、およびBorrelia burgdorferiのスクリーニングは陰性であった。 1:20,480(スペックル型)の力価を有する抗核抗体が見出された。 組換えA、Cおよび68kD-リボ核タンパク質に対する抗体が検出された。 混合結合組織疾患(MCTD)の診断が行われ、20mgの用量でプレドニゾロンによる治療は、メトトレキサートを継続することなく再開始された。

これらの介入にもかかわらず、患者は39℃までの進行中の発熱に苦しんだ。, いくつかの血液培養は無菌のままであり、広範な放射線画像にもかかわらず、彼女の発熱性疾患の焦点は見つからなかった。 末梢血上のT細胞インターフェロン(IFN)-γリリースアッセイ(TIGRA;QuantiFERON-TB Gold in-tube testTM;Cellestis Ltd、カーネギー、オーストラリア)は、3.12IU·mL−1(カットオフ値<0.35IU·mL-1)で強く陽性であり、MTB、過去のTBまたはアクティブTBによる潜伏感染を示唆していた。, TIGRAに用いられる抗原としては、早期抗原標的(ESAT)-6および培養ろ液タンパク質(CFP)-10がleprae8、9を形成する抗原と交差反応することがあり、下肢の病変から皮膚生検を行い、結節性紅斑と診断された。 病変からのMycobacteriumlepraeに対するPCRは陰性であった。

病院で4週間後、患者はさらなる診断のために現在の著者の診療所(メディカルクリニック、研究センターボルステル、ボルステル、ドイツ)に移された。, 胸郭のhigh解能ctスキャンでは胸水,腺症,空洞,凝結,つぼみ現象は認められなかった。 MCTDの診断と一致する非特異的間質性肺炎のように、主に下部肺セグメントにおける対称粉砕ガラスの不透明度が示された(fig. 1⇓) 10, 11.

iv xmlns:xhtml=”http://www.w3.org/1999/xhtml”>図。, 1-

混合結合組織疾患の診断と互換性のある非特異的間質性肺炎のように、主に下肺セグメントにおける対称グラウンドガラス不透明度を示す胸 胸水,アデノパチー,キャビテーション,コンソリデーション,ツリー-イン-バッド現象は認められなかった。

ツベルクリンPPD RT23SSI(注射用2TU/0.1mL溶液;Statens血清研究所、コペンハーゲン、デンマーク)は、0 48および72時間後に硬結のmmを明らかにした。, しかし、別のMTB固有のTIGRA、Tスポットで。TBアッセイ(Oxford Immunotec、Abingdon、UK)、59および31スポット形成細胞(SFCs)250,000末梢血単核細胞(Pbmc)あたりを、血液試料中のESAT-6およびCFP-10に応答して列挙した(カットオフ値>5SFCs/250,000 2πおよび表1π)。 LTBIの診断のために、体重のイソニアジド5mg·kg−1による治療が開始された。

図。 2-

肺結核の診断のための結核菌特異的酵素結合免疫スポットアッセイ。, マイクロタイトルウェルは、250,000末梢血単核細胞(a、c、eおよびg)または250,000気管支肺胞単核細胞それぞれ(b、d、fおよびh)および刺激されていない(陰性対照;aおよびb)または植物ヘマグルチニン(陽性対照;cおよびd)、早期分泌抗原標的-6(eおよびf)または培養濾液タンパク質-10(gおよびh)のいずれかでインキュベーションされる。,

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表1—

スポット形成細胞(SFCs)の正味数と結核菌特異的酵素連結免疫スポットアッセイ反応性の解釈

afbsは三つの別々の朝sputaに見られませんでした。 MTB DNAは、MTB特異的核酸増幅技術(Bdprobetectm ET assay;Becton Dickinson,Sparks,MD,USA)によって患者の喀痰中に検出できなかった。, その後,BALによる気管支鏡検査および経気管支生検を行った。 BAL差動数は、77%の肺胞マクロファージ、18%のリンパ球、4%の好中球および0.6%の好酸球を有するリンパ球性肺胞炎を明らかにした。 BalではAfbsもMTB DNAも検出できなかった。 生検の病理組織学的検査ではリンパ球およびneut球細胞浸潤を認め,肉芽腫は認められなかった。

MTB特異的ELISPOT(Oxford Immunotec)は、前述7のようにbal単核細胞(BALMCs)に対して行い、活性TBをLTBIから区別した。, 刺激されていないコントロールでは、117SFCs/250,000BALMCsが発見されました。 しかし、ESAT-6およびCFP-10Sfcの数は両方とも400/250,000を超え、事前刺激リンパ球およびMTB抗原特the T細胞の肺への動員を示し、活性pTBを強く示唆している(図。 2πおよび表1π)。

これらの結果を受け取ると、リファンピン、エタンブトールおよびピラジナミドによる治療は、四重抗結核療法のために追加されました。 18日後、患者からの喀痰培養でMTBが発見された。

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